Desbaste químico de las secciones de LR White:
Esta técnica ha sido utilizada para mejorar la accesibilidad de los sitios antígenos, o la "recuperación del antígeno", en la sección
de microscopía electrónica. Recomendaríamos la lectura del artículo "Antigen Unmasking for Immuno electron Microscopy: Labeling is Improved by Treating with Sodium Ethoxide or Sodium Metaperiodate, then Heating on Retrieval Medium", Journal of Histochem. and Cytochem., 43:115-123 (1995).
Marcaje de las secciones:
Hay numerosos informes en la literatura publicada donde se describen diversas técnicas de secciones inmunomarcadas. La mayoría de ellas involucra la utilización de acetato de uranilo como tinción negativa.
Inclusión tisular de plantas:
En el caso de muchos
investigadores, han experimentado cierta dificultad en la inclusión de tejido de plantas con otros sistemas de resinas.
Con la LR White cuya viscosidad es casi como la del agua, puede infiltrarse muy fácilmente (relativamente hablando, por supuesto) y
hay mucho publicado sobre la inclusión tisular de plantas.
La resina en sí, viene lista para usarse y si se pretende utilizarla a baja temperatura, uno necesita
el SPI #02648-AB, que es un acelerador que viene en una botella gotero fácil de usar.
La resina está disponible en tres grados, dura, media y suave, siendo los grados duro y medio mucho más populares con la mayoría de los usuarios, que el grado "suave".
Resina para inclusión L R White vs. Araldite® 502
Se han llevado a cabo algunas comparaciones entre inclusiones de LR White vs las de Araldita. La conclusión fue que a pesar del procesamiento menos riguroso asociado con el uso del LR White, ni la apariencia
o la cantidad de material extracelular fueron afectados por los diferentes protocolos de inclusión. Nuestra interpretación del significado de
este resultado es que algunos sitios antígenos son más sensibles a la disrupción por alcohol que otros, y en este caso, los sitios deben haber sido bastante resistentes a tal disrupción. Pero para otros sistemas,
lo opuesto es la verdad. El asunto es que para un sistema nuevo, con frecuencia vale la pena tratar varios diferentes enfoques de inclusión, para poder determinar
cuál es el óptimo para esa situación específica.
Polimerización:
Los tres grados de resinas se pueden polimerizar bien sea químicamente a baja temperatura, utilizando irradiación con UV a 365 nm, o mediante temperaturas elevadas en estufa convencional o mediante técnicas de microondas. Advierta que este sistema de resina no es apto para usarse con acetona, puesto que la presencia de cualquier cetona inhibirá la polimerización.
Cada botella de resina viene completa con cinco diferentes monografías para proporcionar asistencia al usuario de la resina:
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