En microscopía de luz y microscopía electrónica, la elección de la preparación del espécimen, es crítica para la preservación de antígenos en la muestra. En la agenda de la preparación, la fijación y la infiltración son de la mayor importancia. El protocolo debe satisfacer los requerimientos para la preservación de la integridad estructural y la antigenicidad.
Habiendo preparado el espécimen de tejido para inmunomarcaje, es imperativo realizar las incubaciones con un protocolo diseñado para maximizar la señal específica y minimizar el transfondo. Algunas condiciones de la incubación pueden causar que las secciones de tejido sean removidas del portaobjeto de vidrio. Los adhesivos típicos de sección tisular tales como la poli-L-lisina, el adhesivo de Elmer's, alumbre de cromo, etc. no son apropiados para uso con marcaje de inmunooro, debido a el trasfondo que se resalta a causa de la atracción de las partículas de oro hacia el adhesivo del portaobjeto.
Además, la superficie de los portaobjetos de vidrio es dispareja y se activa mediante la estructura tetraédrica del sílice. Esto proporciona sitios activos para la absorción de proteínas o reacciones de químicos con reactivos. Es por lo tanto importante minimizar esta posibilidad mediante el recubrimiento de la superficie con un material que tenga baja reactividad respecto de los reactivos.
SPI Supplies brinda ahora la solución BioBond™, especial para portaobjetos, que provoca un adhesión muy fuerte entre el vidrio y la sección de tejido para incubaciones subsecuentes. BioBond reviste el portaobjetos con una capa protectora que minimiza la interacción de la superficie de vidrio cargada, con los reactivos. Esto es también de particular importancia para la reproductibilidad de resultados debido a las variaciones que ocurren entre los portaobjetos de vidrio obtenidos de fuentes distintas de diferentes países. Es particularmente efectivo para uso en condiciones severas de incubación tales como las que se utilizan en hibridación
in-situ. BioBond es apropiado para toda clase de especímenes de tejido incluyendo secciones de cera parafina o de resina, secciones de citocentrifugación o de criostato.
Para el revestimiento de portaobjetos se utiliza una solución al 2%.
BioBond se surte en unidades con un volumen de 250 ml, suficiente para recubrir por lo menos 1000 portaobjetos.
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